商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 兔羊膜成纖細胞

組織來源 羊膜組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 兔羊膜成纖細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種持妊娠的，是個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結構稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層，與眼結膜組織結構相似，含有眼表上皮細胞，包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質(zhì)，其光滑，無血管、神經(jīng)及淋巴，具有定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖母細胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜成纖細胞主要來自基底膜、致密層、纖母細胞層。

方法簡介 實驗室分離的兔羊膜成纖細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔羊膜成纖細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 兔羊膜成纖細胞培養(yǎng)基(基礎培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 成纖細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳3代左右

消化液： 0.25%

原代細胞培養(yǎng)步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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