商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 人外周血T淋巴細(xì)胞

組織來源 外周血

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細(xì)胞簡介 人外周血T淋巴細(xì)胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細(xì)胞（PBMC）即外周血中具有單個核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。目前，主要的分離方法是密度梯度離心法，因?yàn)檠褐懈饔行纬煞值谋戎卮嬖诓町悾虼说靡苑蛛x出不同的細(xì)胞。T淋巴細(xì)胞（T-lymphocyte）來源于骨髓的多能干細(xì)胞（胚胎期則來源于卵黃囊和肝）。在人體胚胎期和初生期，骨髓中的一部分多能干細(xì)胞或前T細(xì)胞遷移到胸腺內(nèi)，在胸腺激素的誘導(dǎo)下分化成熟，成為具有免疫活性的T細(xì)胞。成熟的T細(xì)胞經(jīng)血流分布至外周免疫器官的胸腺依賴區(qū)定居，并可經(jīng)淋巴管、外周血和組織液等進(jìn)行再循環(huán)，發(fā)揮細(xì)胞免疫及免疫調(diào)節(jié)等功能。T細(xì)胞的再循環(huán)有利于廣泛接觸進(jìn)入體內(nèi)的抗原物質(zhì)，加強(qiáng)免疫應(yīng)答，較長期保持免疫記憶。T細(xì)胞的細(xì)胞膜上有許多不同的標(biāo)志，主要是表面抗原和表面受體。這些表面標(biāo)志都是結(jié)合在細(xì)胞膜上的巨蛋白分子。多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榱馨蜆忧绑w細(xì)胞（Lymphoid precursor）遷移至胸腺，在的誘導(dǎo)下，經(jīng)歷一系列有序的分化過程，逐漸在胸腺發(fā)育成熟為識別各種抗原的T細(xì)胞庫。T淋巴細(xì)胞進(jìn)入胸腺后首先經(jīng)歷兩個階段：①早期T淋巴細(xì)胞發(fā)育階段，即始祖CIM和CD8雙陰性T淋巴細(xì)胞（double negative cell, DN）分化為CD4和CD8雙陽性T細(xì)胞（double positive cell, DP）；②DP細(xì)胞分別經(jīng)歷陽性選擇階段和陰性選擇階段獲取MHC限制性識別能力和對自身抗原的耐受性，發(fā)育為其表面標(biāo)志為CD4或CD8的單陽性T細(xì)胞（single positive cell，SP），遷往周圍淋巴器官定居。T細(xì)胞是相當(dāng)復(fù)雜的不均一體、又不斷在體內(nèi)更新、在同一時間可以存在不同發(fā)育階段或功能的亞群，但分類原則和命名比較混亂，尚未統(tǒng)一。按免疫應(yīng)答中的功能不同，可將T細(xì)胞分成若干亞群，一致的有：1、輔助性T細(xì)胞（Helper T cells, Th），具有協(xié)助體液免疫和細(xì)胞免疫的功能；2、抑制性T細(xì)胞（Suppressor T cells, Ts），具有抑制細(xì)胞免疫及體液免疫的功能；3、效應(yīng)T細(xì)胞（Effector T cells, Te），具有釋放淋巴因子的功能；4、細(xì)胞毒性T細(xì)胞（Cytotoxic T cells, Tc），具有殺傷靶細(xì)胞的功能；5、遲發(fā)性反應(yīng)T細(xì)胞（Delayed type hypersensitivity T cells, Td），有參與Ⅳ型反應(yīng)的作用；放大T細(xì)胞（Ta），可作用于Th和Ts，有擴(kuò)大免疫效果的作用；6、原始的或天然T細(xì)胞（Virgin or Natural T cells），他們和抗原接觸后分化成效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞；7、記憶T細(xì)胞（Memory T cell, Tm），有記憶特異性抗原刺激的作用。T細(xì)胞在體內(nèi)存活的時間可數(shù)月至數(shù)年。其記憶細(xì)胞存活的時間則更長。其中，Th細(xì)胞又被稱為CD4+細(xì)胞，因?yàn)槠湓诒砻姹磉_(dá)CD4（cluster of differentiation 4）。通過與MHCⅡ（主要組織相容性復(fù)合體，major histocompatibility complex）遞呈的多肽抗原反應(yīng)被激活。MHCⅡ在抗原遞呈細(xì)胞（antigen presenting cells,APCs）表面表達(dá)。一旦激活，可以分泌細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)或者協(xié)助免疫反應(yīng)。Tc細(xì)胞又名為CD8+細(xì)胞，其表面表達(dá)CD8。這類細(xì)胞可以通過MHCI與抗原直接結(jié)合。淋巴細(xì)胞主要包括T淋巴細(xì)胞（CD3+），B淋巴細(xì)胞（CD19+），NK細(xì)胞（CD16+CD56+）。

方法簡介 實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血T淋巴細(xì)胞采用取外周血、通過密度梯度離心法結(jié)合磁珠分選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血T淋巴細(xì)胞經(jīng)CD3免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基： 人外周血T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含IL-2、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 懸浮

細(xì)胞形態(tài)： 圓形

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 不建議傳代

人外周血T淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

取材與預(yù)處理?：取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細(xì)胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液。

?注意事項(xiàng)?：消化時間需嚴(yán)格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

?細(xì)胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

公司正在出售的產(chǎn)品：