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原代細胞
人原代細胞
YS-01X8304人外周血B淋巴細胞品牌





產(chǎn)品簡介
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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 人外周血B淋巴細胞品牌 | 英文名稱 | Human Peripheral Blood B Lymphocyte Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X8304 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 人外周血B淋巴細胞
組織來源 外周血
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細胞簡介 人外周血B淋巴細胞分離自外周血;B淋巴細胞的祖細胞存在于胎肝的造血細胞島中,此后B淋巴細胞的產(chǎn)生和分化場所逐漸被骨髓所代替。B淋巴細胞簡稱B細胞,成熟的B細胞主要定居于淋巴結(jié)皮質(zhì)淺層的淋巴小結(jié)和脾臟的紅髓和白髓的淋巴小結(jié)內(nèi)。B細胞在抗原刺激下可分化為漿細胞,漿細胞可合成和分泌抗體(免疫球蛋白),主要執(zhí)行機體的體液免疫。與T淋巴細胞相比,它的體積略大。這種淋巴細胞受抗原刺激后,會增殖分化出大量漿細胞。漿細胞可合成和分泌抗體并在血液中循環(huán)。從骨髓來的干細胞或前B細胞,在遷入法氏囊或類囊器官后,逐步分化為有免疫潛能的B細胞。成熟的B細胞經(jīng)外周血遷出,進入脾臟、淋巴結(jié),主要分布于脾小結(jié)、脾索及淋巴小結(jié)、淋巴索及消化道粘膜下的淋巴小結(jié)中,受抗原刺激后,分化增殖為漿細胞,合成抗體,發(fā)揮體液免疫的功能。
方法簡介 實驗室分離的人外周血B淋巴細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法結(jié)合磁珠分選制備而來,細胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的人外周血B淋巴細胞經(jīng)CD19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基: 人外周血B淋巴細胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含IL-2、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液一次
生長特性: 懸浮
細胞形態(tài): 圓形
傳代比例: 不傳代
傳代特性: 不建議傳代
人外周血B淋巴細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
原代細胞培養(yǎng)步驟:

取材與預處理?:取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導致細胞死亡。
?細胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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