商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 兔牙乳頭細胞

簡稱 DPCs

組織來源 牙乳頭組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 兔牙乳頭細胞分離自牙乳頭組織；牙乳頭細胞來源于外胚間充質(zhì)，具有多向分化潛能，是體內(nèi)分化為成牙本質(zhì)細胞的前體細胞，該細胞在牙發(fā)育和牙體牙髓損傷修復過程中起重要作用。牙乳頭細胞為未分化的間充質(zhì)細胞，有少量微細的膠原纖分散在細胞外間隙。在鐘狀期，被成釉器凹陷部包圍的外胚間葉組織增多，并出現(xiàn)細胞的分化。在內(nèi)釉上皮的誘導下，牙乳頭外層細胞分化為高柱狀的成牙本質(zhì)細胞。這些細胞在切緣或牙尖部為柱狀，在牙頸部細胞尚未分化成熟，為立方狀。牙乳頭在牙發(fā)育中有重要作用?，F(xiàn)已證明，牙乳頭是決定牙形狀的重要因索。例如，將切牙的成釉器與磨牙的牙乳頭重新組合，結(jié)果形成磨牙；與此相反，切牙的牙乳頭與磨牙成釉器重新組合，結(jié)果形成切牙。牙乳頭還可以誘導非牙源性的口腔上皮形成成釉器。

方法簡介 實驗室分離的兔牙乳頭細胞采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔牙乳頭細胞經(jīng)DMP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 兔牙乳頭細胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、LIF、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 梭形、多角形

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳1-2代

消化液： 0.25%

原代細胞培養(yǎng)步驟：

取材與預(yù)處理?：取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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