商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 兔腎動脈平滑肌細(xì)胞

組織來源 腎動脈組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細(xì)胞簡介 兔腎動脈平滑肌細(xì)胞分離自腎動脈組織；腎動脈的分支為葉間動脈，穿行于腎柱內(nèi)，上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處，形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細(xì)血管，并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈，進入腎小囊后形成球形的毛細(xì)血管網(wǎng)，再匯集成出球小動脈，出腎小體。直小動脈分支形成毛細(xì)血管網(wǎng)，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈、葉間靜脈，后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎，注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管，又是腎的機能血管，與腎泌尿機能密切相關(guān)。腎動脈在腎實質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細(xì)血管網(wǎng)：腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)，血壓較高，利于血漿濾過形成原尿；球后毛細(xì)血管網(wǎng)，血壓較低，利于腎小管的重吸收。腎動脈平滑肌細(xì)胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

方法簡介 實驗室分離的兔腎動脈平滑肌細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔腎動脈平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 兔腎動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細(xì)胞形態(tài)： 成纖細(xì)胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液： 0.25%

原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

取材與預(yù)處理?：取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細(xì)胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴(yán)格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

?細(xì)胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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