細胞簡介：

產(chǎn)品名稱 人骨髓造血干細胞

簡稱 BMHSC

組織來源 骨髓組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 人骨髓造血干細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。造血干細胞具有自我更新能力并能分化為各種血細胞的前提細胞，終生成各種血細胞成分，包括紅細胞，白細胞和血小板。造血干細胞需要根據(jù)機體的生理需求適時的補充血液系統(tǒng)各個成熟細胞組分。同時在損傷、炎癥等應激狀態(tài)下，造血干細胞也扮演著調節(jié)和維持體內血液系統(tǒng)各個細胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中，造血干細胞移植廣泛應用于血液系統(tǒng)疾病以及自身免疫疾病，在其它實體瘤的治療中，比如淋巴瘤，生殖細胞瘤，乳腺癌，小細胞肺癌，主要應用于常規(guī)治療失敗或復發(fā)難治以及具有不良預后因素的患者。造血干細胞以不對稱有絲分裂方式進行增殖，一個干細胞分裂產(chǎn)生兩個子細胞，一個分化為造血祖細胞，另一個則保持干細胞特征。造血干細胞在不斷體外培養(yǎng)產(chǎn)生大量造血祖細胞同時，保持自己既不增殖也不分化。體外培養(yǎng)微環(huán)境合適，造血干細胞可持續(xù)維持培養(yǎng)60天左右。 造血干細胞體外增殖培養(yǎng)需要基質細胞滋養(yǎng)（滋養(yǎng)層細胞），缺少滋養(yǎng)層細胞不增殖，無法長期培養(yǎng)，本產(chǎn)品為收集培養(yǎng)好的造血干懸浮細胞灌裝發(fā)貨，不包含滋養(yǎng)層，因此收貨后建議盡快實驗。

方法簡介 實驗室分離的人骨髓造血干細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養(yǎng)基篩選制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的人骨髓造血干細胞經(jīng)CD34免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品信息：

培養(yǎng)信息：

產(chǎn)品名稱 人骨髓造血干細胞

簡稱 BMHSC

組織來源 骨髓組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 人骨髓造血干細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)???

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數(shù)生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養(yǎng)上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養(yǎng)基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數(shù)100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉入液氮?。

公司正在出售的產(chǎn)品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續(xù)梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養(yǎng)?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養(yǎng)基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養(yǎng)?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術檢測細胞電特性（如鈉電流）。