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原代細(xì)胞
大鼠原代細(xì)胞
YS-01X7445大鼠胸腺上皮細(xì)胞規(guī)格





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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 大鼠胸腺上皮細(xì)胞規(guī)格 | 英文名稱 | Rat Thymic Epithelial Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X7445 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 大鼠胸腺上皮細(xì)胞
組織來源 胸腺組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡介 大鼠胸腺上皮細(xì)胞分離自胸腺組織;胸腺是機(jī)體重要的淋巴器官,其功能與免疫緊密相關(guān),是T細(xì)胞分化、發(fā)育、成熟的場所,還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì),具有內(nèi)分泌技能的器官。胸腺上皮細(xì)胞和胸腺細(xì)胞是胸腺微環(huán)境的重要組成部分,其外,胸腺上皮細(xì)胞組成了胸腺細(xì)胞不同發(fā)育階段的三維結(jié)構(gòu),根據(jù)其在胸腺中位置不同,可分為皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞。胸腺細(xì)胞的發(fā)育和成熟是通過在胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)上皮細(xì)胞的遷移過程中相互作用完成的。此外,胸腺細(xì)胞通過皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陽性選擇和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陰性選擇發(fā)育為能夠識別和耐受自身主要組織相容復(fù)合體和自身抗原的成熟T淋巴細(xì)胞。胸腺上皮細(xì)胞是構(gòu)成胸腺微環(huán)境的主要成份,其形態(tài)、分布和功能多樣。表面抗原表達(dá)具有高度異質(zhì)性,與胸腺細(xì)胞結(jié)合成不同類型復(fù)合體,部分胸腺上皮細(xì)胞相互排列構(gòu)成囊泡樣結(jié)構(gòu)。電鏡觀察,可把胸腺上皮細(xì)胞分為3-6型,用抗胸腺上皮細(xì)胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細(xì)胞分為9種類型。
方法簡介 實驗室分離的大鼠胸腺上皮細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的大鼠胸腺上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、鼠尾膠原蛋白Ⅰ型(1×)或鼠尾膠原蛋白Ⅰ型(1 mg/mL) 、PBS 、培養(yǎng)基
包被條件: 鼠尾膠原Ⅰ(2-5 μg/cm2)
培養(yǎng)基: 大鼠胸腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液一次
生長特性: 貼壁
細(xì)胞形態(tài): 上皮細(xì)胞樣
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳1-2代
消化液:0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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