SERPINA3重組兔單克隆抗體

英文別名：AACT_HUMAN; SERPINA3; alpha-1-antichymotrypsin; ACT; Cell growth-inhibiting gene 24/25 protein; Serpin A3; GIG24; GIG25; serpin family A member 3;

交叉反應(yīng)：Human

抗體來(lái)源：Rabbit

免疫原：Full length native Protein : 1-423/423

亞型：IgG

性狀：Lyophilized or Liquid

純化方法：affinity purified by Protein A

克隆類型：Recombinant

克隆號(hào)：A12D5

理論分子量：45 kDa

濃度：1mg/ml

儲(chǔ)存液：PBS, Glycerol, BSA.

研究領(lǐng)域：Cardiovascular > Blood > Serum Proteins

Cell Biology > Proteolysis / Ubiquitin > Proteolytic enzymes > Other proteases

Neuroscience > Neurology process > Neurodegenerative disease > Alzheimer's disease > Proteases

簡(jiǎn)介：

α-1抗胰（SERPINA3，又稱α-1抗，A1ACT）是一種蛋白酶抑制劑（Serpin），屬于Serpin超家族成員，主要功能是抑制中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶和肥大細(xì)胞類，參與炎癥調(diào)節(jié)和血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE1→ACE2）的轉(zhuǎn)化過(guò)程?。

產(chǎn)品特性：

?抗體類型?：重組兔單克隆抗體，通過(guò)基因工程技術(shù)制備，具有高特異性和低交叉反應(yīng)性?。

?應(yīng)用范圍?：適用于Western Blot（WB）、免疫組化（IHC）、免疫熒光（IF）等實(shí)驗(yàn)，可檢測(cè)人、小鼠、大鼠等物種的SERPINA3蛋白表達(dá)?。

實(shí)驗(yàn)方法：

1. ?樣本制備?

?組織樣本?：取新鮮組織（如肝、肺）或石蠟包埋組織，用PBS沖洗后勻漿，離心（12,000 rpm，10分鐘）取上清液?。

?細(xì)胞樣本?：培養(yǎng)細(xì)胞用消化后裂解（含蛋白酶抑制劑），離心后收集上清?。

2. ?抗體稀釋?

?推薦稀釋比例?：

Western Blot（WB）：1:1000-1:5000（含1% BSA的TBS-Tween 20緩沖液）?。

免疫組化（IHC）：1:200-1:1000（需抗原修復(fù)）?。

3. ?Western Blot實(shí)驗(yàn)步驟?

?

?電泳與轉(zhuǎn)膜?：SDS-PAGE分離蛋白后轉(zhuǎn)至PVDF膜，5%脫脂牛奶封閉1小時(shí)?。

?孵育抗體?：一抗4℃過(guò)夜，二抗（HRP標(biāo)記）室溫1小時(shí)?。

?顯影?：ECL化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)信號(hào)?。

4. ?免疫組化（IHC）?

?抗原修復(fù)?：石蠟切片經(jīng)檸檬酸鈉緩沖液（pH 6.0）高壓修復(fù)?。

?封閉與孵育?：3% H?O?滅活內(nèi)源酶，一抗4℃過(guò)夜?。

?顯色?：DAB顯色，蘇木精復(fù)染?。

操作方法及相關(guān)技術(shù)要點(diǎn)：

一、抗體制備流程

?免疫方案設(shè)計(jì)?

采用健康新西蘭白兔（2-3kg），以SERPINA3重組蛋白與弗氏佐劑（初免）或不佐劑（加強(qiáng)免疫）乳化后，通過(guò)皮下/肌肉注射免疫?？乖瓌┝繛?00-500μg/次，間隔2-4周加強(qiáng)免疫3-5次，通過(guò)ELISA監(jiān)測(cè)血清效價(jià)?。

?B細(xì)胞分離與單克隆化?

末次免疫后1-2周采集脾臟，研磨制備單細(xì)胞懸液，通過(guò)流式分選或有限稀釋法獲取特異性B細(xì)胞?。

采用單B細(xì)胞技術(shù)時(shí)，需通過(guò)RT-PCR擴(kuò)增重/輕鏈可變區(qū)基因，并克隆至表達(dá)載體?。

二、抗體純化與鑒定

?表達(dá)與純化?

雜交瘤細(xì)胞或重組表達(dá)系統(tǒng)（如HEK293）培養(yǎng)后，通過(guò)蛋白A/G親和層析或離子交換層析純化抗體?。

聚乙二醇化修飾需檢測(cè)PEG殘留量及錯(cuò)配異構(gòu)體（RP-UPLC法）。

?質(zhì)量控制?

?活性檢測(cè)?：ELISA法測(cè)定與SERPINA3抗原結(jié)合活性，EC50值需符合標(biāo)準(zhǔn)。

?純度分析?：SEC-HPLC檢測(cè)單體含量（>99%），CEX-HPLC分析電荷異質(zhì)性。

公司正在出售的產(chǎn)品：