商品介紹：

公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

相關產(chǎn)品：

Recombinant Human CPR宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human RAB11B宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human NGF宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human IAPP宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   
操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

應用類型: Other英文名稱: phospho-GSK-3 Beta (Ser9)英文別名: GSK3 beta (phospho S9); p-GSK3 beta (phospho S9); GSK3B(Phospho-Ser9); GSK3B(Phospho-S9); p-GSK-3 Beta(Ser9); p-GSK-3 beta(S9); Glycogen synthase kinase 3 beta; GSK 3 beta; GSK 3B; GSK3B; GSK3B protein; GSK3beta isoform; GSK3 beta; Glycogen synthase kinase-3 beta; GSK-3 beta; GSK3B_HUMAN.

phospho-RPS6KB1 (Ser427)產(chǎn)品名稱: 核糖體S6蛋白激mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

應用類型: Other英文名稱: CD3E英文別名: CD3 epsilon; CD3e antigen epsilon polypeptide (TiT3 complex); CD3E antigen epsilon polypeptide; CD3E antigen, epsilon subunit; CD3e molecule epsilon; CD3e molecule, epsilon (CD3 TCR complex); CD3e molecule, epsilon (CD3-TCR complex); CD3E_HUMAN; IMD18; T cell antigen receptor complex epsilon subunit of T3; T cell surface antigen T3/Leu 4 epsilon chain; T cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain; T-cell surface antigen T3/Leu-4 epsilon chain; T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain; T3E; TCRE.

ITCH/AIP4產(chǎn)品名稱: 激活su受體相互作用蛋白4抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

Geminin產(chǎn)品名稱: DNA復制因子抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

TTF1產(chǎn)品名稱: 甲狀核轉(zhuǎn)錄因子-1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Sheep

TBX1產(chǎn)品名稱: 先心相關蛋白TBX1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit, Sheep

Androgen receptor產(chǎn)品名稱: 雄激su受體抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

TGF alpha產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)移生長因子α抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

Haptoglobin產(chǎn)品名稱: 結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse   

脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒PP胎盤蛋白elisa kitHuman placental protein，PP ELISA Kit

人胎盤催乳su(HPL)ELISA試劑盒HPL胎盤催乳suELISA試劑盒Human placenta lactogen,HPL ELISA Kit

人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒HBF胎兒血紅蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human anti-cytomegalovirus IgM antibody,anti-CMV IgM ELISA Kit

人胎兒纖連蛋白(fFN)ELISA試劑盒fFN胎兒纖連蛋白elisa檢測試劑盒Human fetal Fibronectin,fFN ELISA Kit

注意事項：

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作