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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒50T灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒

灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介

灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。

更新時(shí)間:2020-09-28
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:381
產(chǎn)品型號(hào):50T
詳細(xì)介紹在線留言

【產(chǎn)品名稱】灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Madurella grisea
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP6900
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針法)對(duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
非模式菌株研究子囊菌類酵母菌。阿米C21H31NO性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ACAT1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-NLRP3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C23H35NO性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ACAT2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-PECAM1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C36H42N2O9性狀:Powder純度:95.0%
Anti-ACCN1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-Insulin Glargine  Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C36H42N2O8性狀:Powder純度:96.0%
Anti-ACD Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名稱: Anti-MAP2K2 (phospho Thr394) Polyclonal Antibody分子式:C18H19NO4性狀:Powder純度:97.5%
Anti-ACE Monoclonal Antibody宿主: Mouse 英文名稱: Anti-CTNNB1 Monoclonal Antibody分子式:C20H17NO6性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ACE Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名稱: Anti-HSPD1 Polyclonal Antibody分子式:C22H20N2O5性狀:Yellow powder純度:98.5%    Yunaconitoline特異性: 大鼠Arc mRNA原位雜交試劑盒
8-Deacetylyunaconitine特異性: 人、大鼠、小鼠AQP5 mRNA原位雜交試劑盒
Hypoxanthine特異性: 人、大鼠、小鼠ARF1 mRNA原位雜交試劑盒
Yunaconitine特異性: 小鼠ARNTL mRNA原位雜交試劑盒
3-Acetylyunaconitine特異性: 小鼠ARRB2 mRNA原位雜交試劑盒
Hirsuteine特異性: 人、大鼠、小鼠、魚Aromatase mRNA原位雜交試劑盒
Thalirugidine特異性: 大鼠ASIC 1a mRNA原位雜交試劑盒
Anti-ACE Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-MMP2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C19H24N2O2性狀:Yellow powder純度:98.0%
Anti-ACE2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-Phospho-Akt1  Monoclonal Antibody宿主: Mouse分子式:C21H25NO4性狀:Powder純度:98.5%
Anti-Acetyl-Histone H3-K14 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-BECN1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C7H15NO3性狀:Powder純度:99.0%
Anti-Acetyl-Histone H3-K18 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-EGFR Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C10H17N3O6S性狀:Powder純度:98.5%
Anti-Acetyl-Histone H3-K27 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名稱: Anti-VEGFA Polyclonal Antibody分子式:C13H16N2O2性狀:Powder純度:99.0%
Anti-Acetyl-Histone H3-K56 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-EP3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C19H16N3O性狀:Yellow powder純度:99.0%
Anti-Acetyl-Histone H3-K9 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名稱: Anti-DDIT3 Polyclonal Antibody分子式:C12H9NO2性狀:Powder純度:99.0%
Anti-Acetyl-Histone H4-K8 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-Strep tag Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C12H9NO3性狀:Powder純度:%
Anti-ACHE Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-LYVE1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H17NO2性狀:Powder純度:%
Anti-ACHE Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-LILRB4 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C20H24N2O性狀:Powder純度:%
Anti-ACKR2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-PRKAB1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C18H19NO2性狀:Powder純度:%
Anti-ACKR3 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-MCM5 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C8H7NO性狀:Powder純度:%
Anti-ACLY Monoclonal Antibody宿主: Rabbit英文名稱: Anti-CASP6 Polyclonal Antibody分子式:C20H19NO4性狀:Powder純度:%
Anti-ACLY Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-CD3 (FITC) Monoclonal Antibody宿主: Mouse分子式:C7H10N2O2性狀:Powder純度:%
Anti-ACMSD Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-RPSA Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:?株研究子囊菌類酵母菌。香檳酒酵母
灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒LAMP-2抗體(C末端) LAMP-2 Antibody (CT) (LAMP-2, Lysosome associated membrane protein 2)

LAMP2抗體 LAMP2 Antibody,Lysosomal-associated membrane protein 2,CD107B,Cluster of Differentiation 107B,LAMP2,LAMP-2,LAMP 2

LAMP-1抗體(中間區(qū)域) LAMP-1 Antibody (Center) (LAMP-1, Lysosome associated membrane protein 1)

LaminB1抗體 Lamin B1 Antibody,LMNB1,LMN,LMNB,LMN2,Lamin-B1,ADLD,MGC111419

LaminB1抗體 Lamin B1 Antibody,LMB1,LMNB1,LMNB 1,LMNB,LaminB1,LMN

LaminA抗體 Lamin A Antibody,LMNA,HGPS,EMD2,F(xiàn)PLD,CDCD1,LDP1,LGMD1B,IDC,Lamin-A/C,CDDC ,LMN1,CMD1A,PRO1

Lactalbumin抗體 Lactalbumin Antibody

L3MBTL1 L3MBTL1 polyclonal antibody (L3MBTL, L3MBT)

L1細(xì)胞粘附分子 NCAM-L1 Polyclonal Antibody
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

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