公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：溶血磷脂酶Ⅰ(LYPLA1)重組蛋白   

物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Lysophospholipase I (LYPLA1)

APT1; LPL1; LYSOPLA; Acyl-Protein Thioesterase 1

酶與激酶

相關(guān)產(chǎn)品：
賴氨酸tRNA合成酶(KARS)重組蛋白英文名稱：Recombinant Lysyl tRNA Synthetase (KARS)Homo sapiens (Human，人)

賴氨酸特異性去甲基化酶3B(KDM3B)重組蛋白英文名稱：Recombinant Lysine Specific Demethylase 3B (KDM3B)Homo sapiens (Human，人)

賴氨酸特異性去甲基化酶4A(KDM4A)重組蛋白英文名稱：Recombinant Lysine Specific Demethylase 4A (KDM4A)Homo sapiens (Human，人)

賴氨酸特異性去甲基化酶4C(KDM4C)重組蛋白英文名稱：Recombinant Lysine Specific Demethylase 4C (KDM4C)Homo sapiens (Human，人)

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試，條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測

　　誘導(dǎo)表達(dá)成功后，表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng)，按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。

1、樣品前處理：

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管，然后再裂解。

c)對(duì)于組織樣品： 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

特點(diǎn)：

標(biāo)記：標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性，將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記：酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛，結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高。

熒光標(biāo)記：熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一，產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光， 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

FPR3產(chǎn)品名稱: N-甲酰肽受體3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

PARP1產(chǎn)品名稱: 多苷二磷suan多聚mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

Oncostatin M產(chǎn)品名稱: 基因蛋白抑suM抗體交叉反應(yīng): Human

應(yīng)用類型: Other英文名稱: TIA1標(biāo)記: Unconjugated

human CD34/Cy7產(chǎn)品名稱: Cy7標(biāo)記小鼠抗人CD34單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian

DCUN1D4產(chǎn)品名稱: DCN1樣蛋白4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

NRXN2產(chǎn)品名稱: 軸突蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

ACTH (7-23)產(chǎn)品名稱: 促腎上皮質(zhì)激suACTH (7-23)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, GuineaPig

Phospho-NMDAR1 (Ser896)產(chǎn)品名稱: 離子型谷氨suan受體1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow

phospho-PIK3R1 (Tyr467)產(chǎn)品名稱: 磷脂酰肌醇激mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
溶血磷脂酶Ⅰ(LYPLA1)重組蛋白人蛋白酪氨suan磷suanmeiⅣA3(PTPⅣA3)ELISA試劑盒PTPⅣA3蛋白酪氨suan磷suanmeiⅣA3ELISA試劑盒Human Protein Tyrosine Phosphatase Type IVA 3(PTP4A3)ELISA Kit

人蛋白酪氨suan激mei2β(PTK2β)ELISA試劑盒PTK2β蛋白酪氨suan激mei2βelisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Protein Tyrosine Kinase 2 Beta(PTK2b)ELISA Kit

人蛋白聚糖3(PRG3)ELISA試劑盒PRG3蛋白聚糖3elisa檢測試劑盒Human Proteoglycan 3(PRG3)ELISA Kit

人蛋白激meiα(PKIα)ELISA試劑盒PKIα蛋白激meiαelisa kitHuman Protein Kinase Inhibitor Alpha(PKIa)ELISA Kit

人蛋白激meiR(PKR)ELISA試劑盒PKR蛋白激meiRELISA試劑盒Human Protein Kinase R(PKR)ELISA Kit