細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9915

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。

VEGFR2(VEGF-R2)Flk1/FITC 熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CDK6 (Cyclin Dependent Kinase 6) 周期素依賴性激酶6抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體  CD46/MCP/membrane cofactor protein 0.1ml

SHC 英文名稱： SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.2ml

phospho-eIF4EBP1 (Thr37 + Thr46) 英文名稱： 磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-GluR1(Ser836) 磷酸化谷受體1抗體 規(guī)格 0.1ml

CDK6 (Cyclin Dependent Kinase 6) 周期素依賴性激酶6抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

VDAC peptide 電壓依賴性陰離子通道抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PCMT1 天門冬甲基轉(zhuǎn)移酶PCMT抗體 規(guī)格 0.2ml

IL12B Kit Human 人 IL12B / NKSF2 / p40 ELISA配對(duì)抗體 ELISA

TBRG4 英文名稱： 轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白4抗體 0.2ml

C21orf54 英文名稱： 21號(hào)染色體開放閱讀框54抗體 0.2ml

 Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rabbit  Goat IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml

FMDV Polyprotein (3A protein) 英文名稱： 口蹄疫病毒A型抗體 0.2ml

雌受體α/β抗體  ER-α/β Estrpgen Receptor α/β 0.1ml

 Peptide YY/PYY/FITC 熒光素標(biāo)記酪酪肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser235) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat  human IgM/Gold 金標(biāo)記羊抗人IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 體外微管蛋白聚合作用（polymerization）熒光檢測試劑盒20次人二肽基肽酶Ⅳ（DPPⅣ）ELISA試劑盒,

體內(nèi)微管蛋白聚合作用（polymerization）檢測試劑盒5次人甲基化酶（Methylase）ELISA試劑盒,

細(xì)胞骨架（肌動(dòng)蛋白微絲；F-ACTIN）綠色熒光染色試劑盒10次人胎盤催乳素（HPL）ELISA試劑盒,

細(xì)胞骨架（肌動(dòng)蛋白單體；G-ACTIN）紅色熒光染色試劑盒10次人清道夫受體B（SRB/CD36）ELISA試劑盒,

微管（microtubules）熒光染色試劑盒10次小鼠糖原合成酶酶（GSK）ELISA試劑盒,

粘著斑蛋白（vinculin）熒光染色試劑盒10次小鼠N端前腦鈉素（NT-proBNP）ELISA試劑盒,

驅(qū)動(dòng)蛋白（kinesin）型ATP酶活性酶連續(xù)反應(yīng)光譜法定量檢測試劑盒20次小鼠P物質(zhì)受體（SP-R）ELISA試劑盒,

3,4-二氫嘧啶酮衍生物Monastrol（K-ATPase 抑制劑）小鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒,

細(xì)胞αSMA蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒10/20次小鼠熱休克蛋白90（HSP-90）ELISA試劑盒,

載玻片細(xì)胞αSMA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次小鼠胰島素受體β（ISR-β）ELISA試劑盒,

凍切片組織αSMA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B（MMP-9/Gelatinase B） ELISA試劑盒,

石蠟切片組織αSMA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次豚鼠鉤端螺旋體IgG（Lebtospira）ELISA試劑盒,

載玻片細(xì)胞αSMA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次豬食欲素/阿立新B（OX-B）ELISA試劑盒,

凍切片組織αSMA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次豬可溶性P選擇素（sP-Selectin）ELISA試劑盒,

石蠟切片組織αSMA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次豬生長素釋放多肽（GHRP）ELISA試劑盒,