產(chǎn)品名稱：小鼠正常肝細胞;NCTC 1469

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9913

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內裝異丙醇，在-80度并內可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

sVEGFR2/sFLK-1/FITC 熒光素標記可溶性血管內皮生長因子受體2抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CDK8(Cyclin Dependent Kinase 8) 周期素依賴性激酶8抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CD49(非常晚期抗原)抗體  CD49/VLA 0.1ml

Phospho-SRC-3 (Thr24) 英文名稱： 磷酸化類固醇受體輔助活化因子-3 0.1ml

EPHA10 英文名稱： 酪酸蛋白激酶受體A10抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-GIT1(Tyr554) 磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1 規(guī)格 0.1ml

CDK8(Cyclin Dependent Kinase 8) 周期素依賴性激酶8抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

IL-21 人白介素-21Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 ChRM2 毒蕈堿型乙酰膽堿受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Nucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD 核仁蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml

RNA plant 植物RNA提取的專用試劑 50ml

TBX18 英文名稱： 轉錄因子Tbx18抗體 0.2ml

COL4A3BP 英文名稱： IV型膠原α3結合蛋白抗體 0.2ml

 ChRM2 毒蕈堿型乙酰膽堿受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  Guinea pig IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml

phospho-FAK(Ser732) 英文名稱： 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml

上皮特異性抗原抗體  ESA 0.1ml

 PEPT2 /FITC 熒光素標記腸道肽轉運蛋白2/小肽轉運蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser202) 磷酸化微管相關蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat  mouse IgM/Gold 金標記羊抗小鼠IgM(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
小鼠正常肝細胞;NCTC 1469石蠟切片銅熒光（CSI）染色試劑盒20次葡聚糖T20

凍切片銅熒光（CSI）染色試劑盒20次硝酸纖維素薄膜

線粒體銅離子熒光（CTAP-1）染色試劑盒20次人抗人類缺陷病抗體（HIV）ELISA試劑盒, HIV ELISA

高爾基體銅離子熒光（CTAP-1）染色試劑盒20次人羥賴（Hyl）ELISA試劑盒,Hyl ELISA

銅離子膜通道轉運功能（P型ATP酶）綠色熒光檢測試劑盒20次人骨粘連蛋白（ON）ELISA試劑盒,ON ELISA

銅離子膜通道轉運功能（CTR）綠色熒光檢測試劑盒20次人組（HIS）ELISA試劑盒,HIS ELISA

銅蛋白電泳染色試劑盒10次人β內酰酶（β-lactamase）ELISA試劑盒,

動物細胞銅ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測試劑盒20次人組織相容性2-K1-K 區(qū)（H2-K1）ELISA試劑盒,

動物組織銅ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測試劑盒20次人纖維母表面抗原（FSP）ELISA試劑盒,

銅ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測試劑盒20次人性休克綜合征素1（TSST-1）ELISA試劑盒,

酵母銅ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測試劑盒20次人高速泳動蛋白17（HMG-17）ELISA試劑盒,

植物銅ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測試劑盒20次小鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯（AcSDKP）ELISA試劑盒,

線粒體分裂（fission）和融合（fusion）分析試劑專題大鼠卵清蛋白特異性IgE（OVA sIgE）ELISA試劑盒,

DRP-1蛋白表達檢測試劑盒10/20次大鼠生長素釋放多肽（GHRP）ELISA試劑盒,

OPA-1蛋白表達檢測試劑盒10/20次大鼠促性腺素釋放素（GnRH）ELISA試劑盒,

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內（試管內每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。