商品介紹：

公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

相關(guān)產(chǎn)品：

CD15分子(CD15)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 15 (CD15)Homo sapiens (Human，人)

CD26分子(CD26)活性蛋白英文名稱：Active Cluster Of Differentiation 26 (CD26)Homo sapiens (Human，人)

CD26分子(CD26)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 26 (CD26)Homo sapiens (Human，人)

CD38分子(CD38)真核蛋白英文名稱：Eukaryotic Cluster Of Differentiation 38 (CD38)Homo sapiens (Human，人)   
操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Kinesin 5B產(chǎn)品名稱: 驅(qū)動(dòng)蛋白KIF5B抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

RALGPS1產(chǎn)品名稱: RALGPS1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

PER2產(chǎn)品名稱: 節(jié)律蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

Integrin alpha 2產(chǎn)品名稱: 整合suα2（CD49b）抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit

C4a+C4b產(chǎn)品名稱: 補(bǔ)體C4a+C4b蛋白抗體交叉反應(yīng): Human

PTPNS1L2產(chǎn)品名稱: 信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白SIRPD抗體交叉反應(yīng): Human

SF3B2產(chǎn)品名稱: 選擇性剪接因子3B亞基2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

Endostatin產(chǎn)品名稱: 內(nèi)皮抑su/內(nèi)皮他丁抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

HDHD2產(chǎn)品名稱: HDHD2蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, GuineaPig, Cat

GDPGP1產(chǎn)品名稱: 15號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框58抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Horse   

琥珀酸脫氫酶復(fù)合體A亞基(SDHA)重組蛋白人集聚蛋白(AGRN)ELISA試劑盒AGRN集聚蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Agrin(AGRN)ELISA Kit

人集鈣蛋白2(CASQ2)ELISA試劑盒CASQ2集鈣蛋白2elisa檢測(cè)試劑盒Human Calsequestrin 2(CASQ2)ELISA Kit

人集鈣蛋白(CASQ)ELISA試劑盒CASQ集鈣蛋白elisa kitHuman Calsequestrin(CASQ)ELISA Kit

人激肽釋放mei原(PK)ELISA試劑盒PK激肽釋放mei原ELISA試劑盒Human Prekallikrein(PK)ELISA Kit

人激肽釋放mei結(jié)合蛋白(KAL)ELISA試劑盒KAL激肽釋放mei結(jié)合蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Kallistatin(KAL)ELISA Kit  
注意事項(xiàng)：

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆，切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí)，有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù)，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作