產(chǎn)品名稱：3-磷酸甘油酸激酶（PGK）測(cè)試盒品牌

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測(cè)試方法:微量法、紫外分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6469

測(cè)定意義

3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關(guān)鍵酶，廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi)，催化1，3-二磷酸甘油酸轉(zhuǎn)變?yōu)?-磷酸甘油酸，產(chǎn)生1分子ATP，具有影響DNA復(fù)制和修補(bǔ)及刺激病毒RNA合成等生物學(xué)功能，廣泛應(yīng)用于藥物靶標(biāo)設(shè)計(jì)。

測(cè)定原理

3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產(chǎn)生1,3-二磷酸甘油酸和ADP，1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產(chǎn)生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸，340nm處的吸光度變化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明！

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過(guò)濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或*將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

Anti-TPO/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

PP-2B alpha 1 蛋白磷酸酯酶-2B 催化亞單位(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體 Anti-TPO 0.1ml

AP180 英文名稱： 裝配銜接蛋白180抗體 0.2ml

EGR3 英文名稱： 早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白3抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-ITGB4(Tyr1530) 磷酸化整合素β4抗體 規(guī)格 0.1ml

PP-2B alpha 1 蛋白磷酸酯酶-2B 催化亞單位(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

pre-X protein[Hepatitis B virus]N-Terminus 乙肝病毒pre-X蛋白抗原(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Aurora A/B/C 有絲分裂激酶A/B/C抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗體 規(guī)格 0.1ml

MBP 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

UNC93B 英文名稱： 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白UNC93B抗體 0.2ml

Choline kinase alpha 英文名稱： 乙醇胺激酶α抗體 0.1ml

Anti-Aurora A/B/C 有絲分裂激酶A/B/C抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

S100A11 英文名稱： S100鈣結(jié)合蛋白A11抗體 0.1ml

EpCAM 英文名稱： 上皮特異性抗原抗體 0.1ml

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體 Anti-STAT2 0.2ml

anti-Rarres2/TIG2/FITC 熒光素標(biāo)記視黃酸受體應(yīng)答蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MAP2 (Thr1620/1623) 磷酸化微管相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml

Nociceptin receptor 孤菲肽受體(痛敏肽受體)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
3-磷酸甘油酸激酶（PGK）測(cè)試盒品牌氧化鎂碳酸鈉合劑獐牙菜苷 IL-9（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）

苯乙(>98%,BR)豆腐果苷 IL-10（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）

L-乳酸乙酯(>99%,GC)石杉?jí)A甲 IL-11（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）

溴乙烷(>98%,BR)川陳皮素 IL-12 P35（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）

月桂酸乙酯(>98%,BR)告達(dá)亭苷元 IL-12 P40（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）

乙基曙紅(>95%,BS)青陽(yáng)參苷元A IL-13（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）

沒(méi)食子酸乙酯青陽(yáng)參苷元B IL-14（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）

煙酸乙酯(>98%,BR)補(bǔ)骨脂酚 IL-15（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）