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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心天然蛋白、重組蛋白重組蛋白/RP鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重組蛋白

鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重組蛋白
產(chǎn)品簡(jiǎn)介

鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:己糖激mei1(HK1)重組蛋白英文名稱:Recombina Hexokinase 1 (HK1)磷suan肌醇-3-激mei催化亞基β肽(PIK3Cb)重組蛋白英文名稱:Recombina Phosphoinositide-3-Kinase Catalytic Beta Polypeptide (PIK3Cb)彈性3B(ELA3B)重組蛋白英文

更新時(shí)間:2023-03-22
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問(wèn)量:447
產(chǎn)品型號(hào):
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公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重組蛋白

Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 3 (SMPD3)

Homo sapiens (Human,人)

商品介紹:

NSMASE2; Neutral Sphingomyelinase II

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測(cè)分子量:29.9kDa

實(shí)際分子量:30kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Asp417~Gly651 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):4.8

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關(guān)產(chǎn)品:

周期素依賴性激酶4(CDK4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4)Homo sapiens (Human,人)

周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 5 (CDK5)Homo sapiens (Human,人)

周期素依賴性激酶6(CDK6)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 6 (CDK6)Homo sapiens (Human,人)

周期素依賴性激酶7(CDK7)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 7 (CDK7)Homo sapiens (Human,人)   

注意事項(xiàng):

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Annexin V產(chǎn)品名稱: 膜粘連蛋白5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, GuineaPig

Menin產(chǎn)品名稱: Menin抑蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

RhoF產(chǎn)品名稱: RhoF蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep

PAG608產(chǎn)品名稱: 野生型P53誘導(dǎo)基因1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse

PDGF-D/SCDGFB產(chǎn)品名稱: 小板源性生長(zhǎng)因子D/脊髓源性生長(zhǎng)因子B抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

PDILT產(chǎn)品名稱: 蛋白二硫鍵異構(gòu)meiA7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

RPE65產(chǎn)品名稱: 視網(wǎng)膜色su上皮細(xì)胞特異性蛋白65抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit

Sumo 3產(chǎn)品名稱: 泛su樣蛋白Sumo3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow

BAG5產(chǎn)品名稱: BCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog

STAT4產(chǎn)品名稱: 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit   

鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重組蛋白L-蘇氨suan脫氫mei(TDH)ELISA試劑盒TDHL-蘇氨suan脫氫meielisa kitHuman L-Threonine Dehydrogenase(TDH)ELISA Kit

Ly6/神經(jīng)毒su1(LYNX1)ELISA試劑盒LYNX1Ly6/神經(jīng)毒su1ELISA試劑盒Human Ly6/Neurotoxin 1(LYNX1)ELISA Kit

Lunapark蛋白(LNP)ELISA試劑盒LNPLunapark蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Lunapark(LNP)ELISA Kit

LIM半胱氨suan豐富域蛋白1(LMCD1)ELISA試劑盒LMCD1LIM半胱氨suan豐富域蛋白1elisa檢測(cè)試劑盒Human LIM And Cysteine Rich Domains Protein 1(LMCD1)ELISA Kit

Limkainβ1蛋白(LKAP)ELISA試劑盒LKAPLimkainβ1蛋白elisa kitHuman Limkain b1(LKAP)ELISA Kit 


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