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產(chǎn)品中心

PRODUCTS CNTER

當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心天然蛋白、重組蛋白重組蛋白/RP氨基己糖苷酶Aα(HEXa)重組蛋白

氨基己糖苷酶Aα(HEXa)重組蛋白
產(chǎn)品簡(jiǎn)介

氨基己糖苷酶Aα(HEXa)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:巴氏阿米巴原蟲PCR檢測(cè)試劑盒Balamuthia mandrillarisPCR巴馬森林病毒PCR檢測(cè)試劑盒Barmah Forest Virus(BFV) RTPCR桿狀巴爾通體PCR檢測(cè)試劑盒Bartonella bacilliformisPCR伊麗莎白巴爾通體PCR檢測(cè)試劑盒Bartonella elizabethaePCR巴氏阿米巴

更新時(shí)間:2023-03-20
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:604
產(chǎn)品型號(hào):
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公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:氨基己糖苷酶Aα(HEXa)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Hexosaminidase A Alpha (HEXa)

TSD; Hex-A; Tay Sachs Disease; GM2 Gangliosidosis; Beta-Hexosaminidase Subunit Alpha; Beta-N-Acetylhexosaminidase Subunit Alpha; N-Acetyl-Beta-Glucosaminidase Alpha

酶與激酶

代謝通路

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::溶酶體

預(yù)測(cè)分子量:28.4kDa

實(shí)際分子量:28kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:His318~Thr529 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):5.7

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

特點(diǎn):

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高。

熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human MMP12宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human COL1A2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human EIF2S1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human PPARGC1B宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

圖片6.png



標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測(cè)和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。

human CD86/PE產(chǎn)品名稱: PE標(biāo)記小鼠抗人CD86單克隆抗體交叉反應(yīng): Human

STK36產(chǎn)品名稱: 絲氨suan/蘇氨suan激mei36融合同源蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Sheep

MAP4產(chǎn)品名稱: 微管相關(guān)蛋白4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

Centrin 1產(chǎn)品名稱: 中心體蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse

Histone H4 (Acetyl K5)產(chǎn)品名稱: 乙酰化組蛋白H4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

應(yīng)用類型: Other英文名稱: Cyclin E1英文別名: CCNE 1; CCNE; CCNE1; Cyclin Es; Cyclin Et; CyclinE; G1/S specific cyclin E; G1/S-specific cyclin-E1; CCNE1_HUMAN; pCCNE1.

CACNB1產(chǎn)品名稱: 鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

TIE2產(chǎn)品名稱: 生成su受體2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse

Caspase-8 subunit p18產(chǎn)品名稱: 半胱氨suan蛋白mei8抗體交叉反應(yīng): Human, Rat, Dog, Pig

SPOCK2產(chǎn)品名稱: 睪丸蛋白聚糖2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
氨基己糖苷酶Aα(HEXa)重組蛋白人細(xì)胞色sub561(cytb561)ELISA試劑盒cytb561細(xì)胞色sub561ELISA試劑盒Human lipocalin 2,LCN2 ELISA Kit

人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)ELISA試劑盒CVL細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human cytovillin/ezrin,CVL ELISA Kit

人細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA試劑盒SmIg細(xì)胞膜表面免疫球蛋白elisa檢測(cè)試劑盒Human Surface Membrane Immunoglobulin,SmIg ELISA Kit

人細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒cmDNA細(xì)胞膜DNA抗體elisa kitHuman anti-cell membrane DNA antibody,cmDNA ELISA Kit

人細(xì)胞角蛋白20(CK20)ELISA試劑盒CK20細(xì)胞角蛋白20ELISA試劑盒Human cytokeratin 20,CK20 ELISA Kit
操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作


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